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绵羊痘病毒甘肃流行株糖蛋白基因ORF117的克隆及其原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 王晓霞;郑亚东;骆学农;陈轶霞;李辉;侯俊玲;于三科;才学鹏

作者机构：

关键词： 绵羊痘病毒;ORF117基因;克隆;原核表达

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2009 年 31 卷 05 期

页码： 337-341

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以甘肃景泰疑似羊痘(SP)患病绵羊的皮肤组织中提取的总DNA为模板,经PCR扩增获得SP病毒(SPV)ORF117基因。测序后分析表明,该基因由591个核苷酸组成,编码196个氨基酸;将该基因克隆于pET32载体中,构建重组表达质粒pET-ORF117,用IPTG在不同条件下诱导表达,确定其最佳表达条件。SDS-PAGE电泳分析表明,表达的融合蛋白分子质量为42 ku,主要以包涵体的形式存在。在IPTG浓度为0.1 mM、温度为37℃、诱导6 h时表达量最大,约占菌体蛋白的30%。Western blot试验表明,融合蛋白可被羊痘阳性血清识别,这为研究其在新型疫苗和诊断的研究奠定了基础。

分类号： S852.654

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