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亚洲璃眼蜱差异表达新基因P18的克隆和鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 王玉霞;周金林;周勇志;龚海燕;向飞宇;程天印;刘毅

作者机构：

关键词： 亚洲璃眼蜱;唾液腺;基因;差异表达

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2006 年 28 卷 04 期

页码： 396-400

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了进行抗蜱和蜱传病疫苗的研究,本实验对亚洲璃眼蜱雌蜱吸血前后唾液腺消减文库中获取的一个全长编码基因P18进行了研究。该基因全长519bp,共编码170个氨基酸,分子量为18.36Ku,等电点为4.28。BLAST分析表明,该基因预测的氨基酸与肩突硬蜱、篦子硬蜱唾液腺的抗凝血小肽有30%～40%低度同源性。将该基因亚克隆到pET-32a(+)表达载体,转化BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导,重组融合蛋白以可溶性形式高效表达。将可溶性重组蛋白免疫小鼠后获得的抗血清。经免疫印迹分析表明,该重组蛋白抗体可特异性的识别半饱雌蜱唾液腺中的天然蛋白抗原,而未吸血雌蜱唾液腺中则不显现特异条带。RT-PCR结果进一步证实,该基因在蜱吸血后的唾液腺中差异表达。

分类号： R384.4`S852.746

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