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利用外源基因侧翼序列扩增筛选番茄纯合转基因植株

文献类型： 中文期刊

作者： 贾芝琪;张忠华;崔艳红;李颖;黄三文;杜永臣

作者机构：

关键词： 转基因番茄;侧翼序列扩增;纯合植株筛选

期刊名称：农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2009 年 17 卷 05 期

页码： 80-84

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 传统的纯化外源基因的方法主要是通过多代自交,该方法耗时长,效率低。对转基因材料中外源基因T-DNA区域插入位点两翼序列的分析和扩增,是在转基因后代中筛选纯合转基因植株的新方法。首先,利用酶切连接接头的PCR方法,在番茄(Lycopersicon esculentum)转基因植株中扩增外源基因Avr3a的两翼序列并测序;然后通过该序列设计的引物在转基因植株中验证,得到的两翼序列通过与SGN数据库比对分析,结果发现,外源基因的插入位点有40bp的碱基缺失;最后利用侧翼序列和边界序列设计的引物,在转基因T1代植株中筛选出纯合单株,这些植株在T2代进行验证确实为纯合单株。

分类号： S641.2

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