猫杯状病毒非结构蛋白NS2与宿主细胞互作蛋白的筛选与鉴定
文献类型: 中文期刊
作者: 陈尚琛;董宁宁;高嘉溪;谈晓梅;李娜;罗茂青;王诗诗;朱雯琪;邓应坤;庞帅赛;刘光清;孟春春
作者机构:
关键词: 猫杯状病毒;NS2;免疫共沉淀技术;质谱分析
期刊名称:病毒学报
ISSN: 1000-8721
年卷期: 2025 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2025-2026年度) ; ; 科技核心(2024版)
摘要: 本研究旨在筛选并鉴定猫杯状病毒(Feline calicivirus, FCV)NS2蛋白与宿主细胞蛋白的相互作用,探讨NS2在病毒复制和宿主免疫逃逸中的潜在功能。采用FCV的NS2真核表达质粒转染CRFK细胞,同时设立空载体对照组,每组各三个样本于转染后24h收样进行LC-MS/MS质谱分析,筛选与NS2相互作用的差异蛋白。通过生物信息学分析筛选出与NS2可能存在高度相互作用的宿主蛋白,采用免疫共沉淀(Co-IP)逐一验证宿主蛋白与NS2蛋白之间的相互作用。质谱分析筛选出617个可能与NS2存在特异互作的蛋白。通过GO和KEGG分析,发现差异蛋白主要参与细胞周期调控、DNA代谢、核糖体生物发生等生物学过程。结合FCV在胞内的生活史初步判定HEXIM1、SEC62、FKBP11、RPS15A和DDX20这五个蛋白与NS2蛋白最有可能发生相互作用。最后通过Co-IP实验确认HEXIM1、FKBP11均与NS2之间存在相互作用。本研究通过质谱和免疫共沉淀技术筛选并验证了与NS2发生互作的宿主蛋白,为深入解析其在FCV增殖中的作用提供了新研究方向。
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