基于重组酶介导的等温核酸扩增技术鉴定H9N2亚型禽流感病毒方法的建立及初步评价
文献类型: 中文期刊
作者: 刘莉;张贺楠;莫一群;徐亚亚;金丁丁;齐岩;胡增垒;侯绍华
作者机构:
关键词: H9N2亚型禽流感病毒;重组酶介导等温核酸扩增技术;荧光RT-PCR
期刊名称:中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2025 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)
摘要: 为实现H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的快速诊断,针对H9N2 AIV毒株的HA基因高度保守区域,设计了重组酶介导等温核酸扩增技术(RAA)的扩增引物与探针,并建立了H9N2 AIV RAA结合侧流层析试纸条的检测方法。该方法可借助水浴锅在恒温条件下,30 min内完成整个扩增反应。扩增产物经稀释后,可直接使用试纸条进行结果判定,操作简便快捷。此外,该方法具有良好的特异性,不会与其他禽类病原体发生交叉反应,最低检测限可达1 copy/μL,检测灵敏度高。在对96份临床病料的检测中,H9N2 AIV RAA和荧光RT-PCR(GB/T19438.4-2004)的符合率为94.79%(91/96),表明该方法与金标准检测结果高度一致。综上所述,该H9N2 AIV RAA结合侧流层析试纸条检测方法,具有操作简单、检测速度快、可视化等特点,特别适用于缺乏专业仪器设备的养殖场或基层实验室,可用于H9N2 AIV的快速诊断,为禽流感防控工作提供了有力的技术支持。
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