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猪源GSDMD蛋白多克隆抗体的制备及初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 刘佳;宋洁;李帅;王尚辉;李江南;王春凤;翁长江;曾艳

作者机构：

关键词： 猪源GSDMD;多克隆抗体;效价;初步应用

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2024 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 为制备猪源GSDMD多克隆抗体，构建了重组表达质粒pET-21a-nGSDMD，成功表达并纯化了重组nGSDMD蛋白。将纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备nGSDMD多克隆抗体（pAb），经ELISA检测，抗体效价为1∶64 000。Western-blot和IFA显示该抗体能特异性识别HEK293T细胞中瞬时表达的Flag-GSDMD蛋白和PRRSV感染肺泡巨噬细胞（PAMs）后表达的GSDMD蛋白。该多克隆抗体特异性良好，无交叉反应，能识别检测病毒感染条件下GSDMD切割片段，可用于PRV和PRRSV诱导的细胞焦亡检测。综上，本研究为探究GSDMD蛋白提供了良好的工具，为深入探究GSDMD蛋白的生物学功能奠定了基础。

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