数字农科院2.0

猪伪狂犬病病毒gE蛋白单克隆抗体的制备、表位鉴定及初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 俞机敏;刘宏扬;刘云飞;王尚辉;宋厚辉;张朝霞;翁长江

作者机构：

关键词： 猪伪狂犬病病毒;单克隆抗体;gE蛋白;表位鉴定

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为了制备猪伪狂犬病病毒（PRV）g E糖蛋白的单克隆抗体（MAb），本研究将PRV JM株gE蛋白主要抗原表位区段（aa52～aa238）的基因序列构建重组表达质粒pET-32a-gE，经原核表达及纯化重组蛋白，并免疫BALB/c小鼠。取3次免疫小鼠脾脏制备脾细胞，与小鼠骨髓瘤细胞（SP2/0）细胞融合。通过ELISA筛选杂交瘤细胞株，western blot和间接免疫荧光试验（IFA）鉴定MAb的反应性。使用MAb亚类鉴定试剂盒检测重链和轻链类型。以gE截短合成多肽为抗原，采用间接ELISA方法鉴定MAb识别的抗原表位。并利用MAb鉴定PRV野生型病毒及基因缺失病毒PRV JMΔgE/TK株中gE蛋白的表达情况。结果显示，经间接ELISA方法筛选到1株稳定分泌gE蛋白的单克隆细胞株，命名为4C6B。western blot和IFA均表明本研究筛选的MAb能够特异性识别PRV感染的PK-15细胞中表达的gE蛋白；MAb亚类鉴定结果显示重链类型为IgM型，轻链类型为κ链。间接ELISA结果显示MAb能够识别一个线性B细胞表位131ACHPDLVL GRACVPEAPEMG150。利用制备的MAb腹水进行PRV野毒和gE基因缺失毒株的鉴定，结果显示该MAb能够有效鉴别出PRV JM野毒株与g E缺失株。本研究制备的PRV gE蛋白的4C6B MAb可以用于特异性鉴别PRV JM野毒株和gE基因缺失株，同时，也可以为PRV诊断方法的建立、PRV基因缺失疫苗的构建以及gE蛋白的生物学功能研究提供材料。

分类号：

  • 相关文献

[1]猪伪狂犬病病毒gE37～243蛋白的原核表达及gE蛋白抗体间接ELISA的建立. 凌蒙蒙,孙艺学,邓效禹,王杨,张鹏举,丛彦龙. 2021

[2]猪伪狂犬病病毒gE蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体制备. 李健楠,刘清艳,王娟,邢燕茹,陈荣琳,高硕磊,祝宇翔,杨静怡,祝军,孙英峰,于海. 2025

[3]马立克氏病病毒gE蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 李巧玲,崔红玉,牛军伟,闫帅,高明. 2013

[4]伪狂犬病病毒gE基因的表达及gE蛋白单克隆抗体的制备. 王淑杰,蔡雪辉,刘永刚,吴国军,刘狄萩,张琦,马平,李成君,石文达. 2007

[5]猪伪狂犬病病毒HeN1株gE蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定. 吴桐,彭金美,田志军,王倩,陈志宝,赵蕊. 2017

[6]伪狂犬病病毒变异株gE蛋白单克隆抗体的制备与鉴定. 武吉强,徐晶晶,童武,王涛,叶超,郑浩,单同领,童光志,李国新. 2017

[7]牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白表位鉴定. 周跃辉,朱远茂,任建乐,严昊,王雪枝,马磊,史鸿飞,薛飞. 2015

[8]猴免疫缺陷病毒p27蛋白单克隆抗体结合抗原表位的鉴定. 李亮,林跃智,那雷,汤艳东,吕晓玲,周建华,曲娟娟. 2011

[9]猪肺炎支原体P97蛋白单克隆抗体的制备、表位鉴定及其初步应用. 王宁,谨瑾,刘璐,刘欢欢,姜立波,辛九庆,刘恒贵. 2020

[10]一株PRRSV N蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定. 李敏华,王倩,田志军,金涛. 2019

[11]布鲁氏菌Bp26蛋白单克隆抗体制备及生物学鉴定. 罗意,马春慧,郑福英,李永清,樊晓旭,储岳峰,周沛,许健. 2025

[12]猪伪狂犬病病毒gB蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 马国祥,曹丽艳,张娟,张宇,万颖,孔祥雨,李想通,王娅婷,段月月,袁聪,施磊,郭庆勇,翟少华,郑海学,王琦. 2024

[13]免疫胶体金检测抗猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体方法的建立. 李曦,郭佃磊,符芳,王香玲,李坤鹏,张雪云. 2014

[14]牛疱疹病毒I型糖蛋白E（gE）可溶性表达及其反应原性分析. 杨晨,孙续,丁学智,杨峰. 2023

[15]CD4~+T细胞表位分析鉴定技术研究进展. 周涛,贾怀杰,何小兵,管齐赛,景志忠. 2013

[16]猪急性腹泻综合征冠状病毒核衣壳蛋白新型线性B细胞表位的鉴定. 曹丽艳,孔祥雨,袁聪,段月月,马国祥,施磊,张宇,万颖,李想通,王娅婷,杜煜,郑海学,王琦. 2025

[17]口蹄疫病毒O型中和单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定. 孙悦,邵军军,高闪电,周广青,郭慧琛,常惠芸,张勇,赵兴绪,刘伟. 2025

[18]致病性猪伪狂犬病病毒PRV-JF株的分离与鉴定. 张超范,刘长明,危艳武,刘霓虹. 2008

[19]猪伪狂犬病病毒(PRV-JL株)的分离与鉴定. 马兴杰,罗亚坤,崔尚金. 2014

[20]多重PCR方法用于检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的建立. 岳丰雄,崔尚金,冉多良,戚亭,周盛华. 2010

作者其他论文 更多>>