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猪可溶性CD40L三聚体蛋白的原核表达及其对口蹄疫病毒样颗粒疫苗免疫效果评价

文献类型： 中文期刊

作者： 贺艳艳;陈凌波;魏甜;滕志东;张韵;张铭洋;马文倩;敬晓棋;郭慧琛;穆素雨;孙世琪

作者机构：

关键词： 5B CD40L;口蹄疫;免疫效果

期刊名称：畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 旨在评价猪可溶性CD40L三聚体蛋白对口蹄疫（foot-and-mouth disease，FMD）病毒样颗粒（virus-like particles，VLPs）疫苗的免疫增强效果。（方法）本研究将含猪CD40配体（CD40L）三聚体（5B CD40L）基因的质粒在大肠杆菌BL21（DE3）中表达，纯化的重组5B CD40L蛋白偶联FITC后与PBMCs进行反应，使用荧光显微镜研究CD40L蛋白与单核细胞反应的生物活性。进一步将5B CD40L、VLPs和5B CD40L-VLPs免疫豚鼠，通过检测中和抗体、脾淋巴细胞增殖以及实时RT-PCR评估5B CD40L对VLPs疫苗免疫效果的影响。SDS-PAGE和Western-blot结果显示，表达的重组5B CD40L蛋白大小约32 ku，确定最佳表达条件为16℃、OD600 nm值为0.9、0.5 mmol L-1浓度IPTG诱导12 h；流式细胞仪分析表明，重组CD40L蛋白能与猪外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMCs）表面的CD40蛋白分子结合。5B CD40L联合VLPs可以加速特异性抗体及中和抗体反应，提高脾淋巴细胞增殖水平，并且在5B CD40L-VLPs组中，脾脏细胞的IL-2和INF-γ mRNA显著高于VLPs组。综上所述，5B CD40L具有增强FMD VLPs疫苗体液免疫应答和细胞免疫应答的能力，具有作为疫苗佐剂的潜力。

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