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口蹄疫O型多表位VLP抗原的可溶性表达及其免疫原性

文献类型： 中文期刊

作者： 刘艺佳;刘伟;高闪电;卢海燕;宁小雨;黄海燕;周彤;杨丰利;邵军军

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;病毒样颗粒;分子伴侣;可溶性表达

期刊名称：中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2025 年 12 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为了提高重组口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)多表位病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)抗原在大肠杆菌表达系统中的可溶性表达和VLP组装率,保证VLP结构及抗原的功能,本研究将实验室构建的pET-30a/OME4-VLP重组表达质粒与分子伴侣质粒pTf16共转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,通过LAB(Kan+)筛选阳性重组菌,并优化诱导表达条件,实现口蹄疫O型VLP抗原在大肠杆菌的可溶性表达和正确组装,同时,通过蔗糖密度梯度纯化蛋白、透射电镜检测VLP粒径、Western blot和免疫小鼠试验评价其免疫活性.结果显示,pTf16显著提高了 OME4-VLP的可溶性表达量,且在培养基中添加L-阿拉伯糖(1 g/L)与IPTG(80 μmol/L)低温诱导(16 ℃)20 h后,可溶性蛋白的表达量达到峰值;透射电镜观察可见OME4-VLP呈典型的VLP结构,约为28 nm,与预期大小相符;Western blot结果显示,可溶性蛋白能与口蹄疫O型单克隆抗体发生特异性免疫反应;免疫小鼠结果显示,与包涵体组和对照组相比,可溶性OME4-VLP免疫组的血清抗体水平和细胞免疫反应均高于包涵体组和对照组(P＜0.05).综上,本研究结果显示,OME4-VLP抗原在pTf16分子伴侣的协同作用下,实现了在大肠杆菌表达系统中可溶性自组装,增强了重组蛋白的免疫原性,为利用大肠杆菌规模化生产的口蹄疫多表位VLP疫苗提供了基础资料.

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