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日本血吸虫病肝纤维化中肝星状细胞凋亡标志物的筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 董博文;钟昊然;朱丹霖;李浩;陆珂;傅志强;刘金明;金亚美

作者机构：

关键词： 血吸虫病;肝纤维化;肝星状细胞凋亡;Fas配体

期刊名称：中国寄生虫学与寄生虫病杂志

ISSN： 1000-7423

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版）

摘要： 目的 筛选适用于标记日本血吸虫病肝纤维化（SSLF）宿主肝星状细胞（HSC）凋亡的分子标志物。方法采用文献和数据库检索获取小鼠和日本血吸虫凋亡相关蛋白的氨基酸序列，利用NCBI网站的ProteinBLAST功能对同源蛋白进行相似性分析。取感染日本血吸虫4、8、12周小鼠肝脏，以未感染小鼠为对照，制备肝脏切片，用免疫荧光法检测HSC标志物Desmin和凋亡相关分子的表达情况，并分析感染不同时间后小鼠肝脏HSC的凋亡情况，以筛选出适用于标记SSLF中宿主细胞凋亡的分子标志物。利用Jalview和MEGA11软件对日本血吸虫不同适应性宿主中该凋亡相关蛋白序列进行同源性和系统进化树分析。数据采用GraphPadPrism8软件进行单因素方差。结果 文献检索和数据库检索分别获得18个日本血吸虫凋亡相关蛋白和16个小鼠凋亡相关蛋白。序列相似性比对结果发现，小鼠与血吸虫的凋亡相关蛋白的序列相似性为20%～80%，血吸虫中未发现小鼠Fas和Fas配体（FasL）的同源蛋白。免疫荧光筛选结果显示，感染后8周，凋亡相关蛋白（绿色荧光） Cleaved caspase3、Bad和FasL在虫卵肉芽肿周围皆有明显分布，其中Cleavedcaspase3、Bad除了可标记小鼠肝组织外，还与虫卵有强烈的特异性结合；FasL仅结合宿主的肝组织，与Desmin （红色荧光）有明显的共定位现象，且随着感染时间的延长，FasL与Desmin的共定位现象逐渐增多。FasL+Desmin+细胞（凋亡的HSC）占Desmin+细胞（HSC）的比例在感染后第4周为0%，与未感染组（0%）差异无统计学意义（P> 0.05）；感染后第8和第12周的占比分别为35.36%和89.12%，均高于未感染组（t=13.38和28.77,P <0.01）。不同宿主的FasL序列对比结果显示，小鼠FasL与大鼠、东方田鼠、人、猪、绵羊、水牛、马、犬、猫的序列相似性分别为91.04%、 80.57%、 75.09%、76.24%、76.34%、77.99%、75.27%和77.86%，具有同源性。进化树结果显示，与东方田鼠、人、猪、绵羊、水牛、马、犬和猫相比，小鼠FasL与大鼠的亲缘关系较近。结论 FasL可标记SSLF中宿主HSCs的凋亡。

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