文献类型： 中文期刊
作者： 刘可欣;王超;张傲;刘佳利;谭斌;张淑琴
作者机构：
关键词： 牛病毒性腹泻病毒（BVDV）;全基因组测序;病毒分离;免疫荧光鉴定;遗传进化分析
期刊名称：中国畜牧兽医
ISSN： 1671-7236
年卷期： 2023 年 03 期
页码：
收录情况： 北大核心（2020版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2023版） ; ; 农林核心（2020版）
摘要： 【目的】查明并掌握辽宁地区牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）的流行特性及生物学特点,为BVDV的防治提供理论基础和技术支持。【方法】采集辽宁省某养牛场疑似发生BVDV感染的病死牛脾脏组织,用牛传染性鼻气管炎病毒（Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV）、牛呼吸道合胞体病毒（Bovine respiratory syncytial virus,BRSV）、牛副流感病毒3型（Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3）及BVDV基因特异性引物进行RT-PCR鉴定,将组织液接种MDBK细胞分离病毒。对细胞进行细胞病变效应（CPE）观察后再通过电镜观察、间接免疫荧光试验（IFA）鉴定病毒,PCR扩增病毒全基因组序列并对其进行遗传进化分析。【结果】BVDV特异性引物RT-PCR鉴定结果为阳性,在280 bp处有条带,与预期条带大小相符,其余病原特异性引物未扩增出条带,证明未感染其他病原;分离得到的毒株在MDBK细胞中培养未出现明显细胞病变效应;病毒纯化后,经电镜观察可见直径约为50 nm的病毒粒子;免疫荧光试验结果显示,在接种分离毒株的MDBK细胞内可观察到亮绿色荧光,而对照细胞没有荧光,将分离得到的病毒命名为LN-1株;全基因组扩增序列大小为12 269 bp,遗传进化分析发现,LN-1株与XC、SD-15及ZM-95株在同一分支,与XC株核苷酸相似性为96.2%,属于BVDV-1m型。【结论】本研究成功分离出1株1m型BVDV毒株,对后续疫苗研发、流行病学调查及致病机理等方面研究具有重要意义。
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