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象鼻兰茎尖小液滴玻璃化超低温保存体系建立

文献类型： 中文期刊

作者： 赵月;单璐;陈之光;杨树华;赵鑫;寇亚平;葛红;陈陆琴;任保青;郝瑞杰;贾瑞冬

作者机构：

关键词： 象鼻兰;茎尖;小液滴玻璃化;超低温保存

期刊名称：浙江农林大学学报

ISSN： 2095-0756

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： [目的] 探明象鼻兰Phalaenopsis zhejiangensis 茎尖超低温保存的最适条件，建立适用的小液滴玻璃化超低温保存体系，以实现该物种种质资源的长期稳定保存。[方法] 以象鼻兰组培苗为试验材料，采用小液滴玻璃化法保存象鼻兰茎尖。通过单因素试验方法设置超低温保存程序中不同预培养基蔗糖浓度、不同装载处理时间和不同玻璃化溶液（PVS2）处理时间，优化保存条件，并通过石蜡切片观察超低温保存过程中茎尖组织结构的受损情况。[结果] 将象鼻兰茎尖放在0.5 mol·L-1蔗糖预培养基中4 ℃黑暗条件下保存2 d，装载溶液处理20 min，玻璃化溶液处理120 min后，再将茎尖放入锡纸条的小滴中，经液氮冷冻处理1 h，卸载溶液处理20 min，最高存活率为70.0%。经再生培养后，再生率为43.33%。同时对石蜡切片进行组织观察发现：液氮冻存及卸载环节对细胞结构与功能的损伤程度较为显著。因此，在冻存前对象鼻兰茎尖进行预培养及装载处理优化，对于降低细胞损伤及维持细胞完整性具有重要的作用。[结论] 成功建立了小液滴玻璃化法超低温保存体系，为象鼻兰种质资源的长期保存提供了一种高效且操作简便的方法。图4参34

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