重组犬瘟热病毒rCDV-3的转瓶培养及其在水貂体内的免疫效果评价
文献类型: 中文期刊
作者: 冯楚楚;蔡佳希;李子树;王毓;薛向红
作者机构:
关键词: 犬瘟热病毒;重组病毒;转瓶;疫苗
期刊名称:中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2024 年 46 卷 9 期
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2023-2024年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 为克服犬瘟热疫苗生产病毒效价低的瓶颈,本研究在5 L转瓶中培养Vero细胞,接种重组犬瘟热病毒(CDV)(rCDV-3)和野生型CDV(CDV-3),比较二者的病毒滴度。将rCDV-3按10^(6.0)TCID_(50)接种小鼠和按不同剂量(10^(4.0)TCID_(50)~10^(6.0)TCID_(50))接种水貂,同时设立PBS对照组,免疫后观察各组小鼠及水貂的临床症状,并对小鼠称重。测定接种后小鼠(接种后14 d、28 d及56 d)和水貂(接种后7 d、14 d及28 d)血清中和抗体水平。接种后28 d用CDV强毒r HBF-1攻击免疫组和对照组水貂,21 d后采用荧光定量PCR(q PCR)测定攻毒后各组水貂直肠病毒排出量和各脏器病毒载量。结果显示,在5 L转瓶中,rCDV-3和CDV-3最高病毒滴度分别为10^(6.75)TCID_(50)/mL和10^(5.67)TCID_(50)/mL;接种后小鼠和水貂无临床症状,不同剂量感染的小鼠体质量百分比的变化基本一致,各组小鼠和水貂均产生了高水平的中和抗体。水貂攻毒后,免疫组水貂均无临床症状,对照组水貂出现体温升高、排便稀、结膜炎等典型CDV感染的临床症状,并在21 d内全部死亡。qPCR测定水貂直肠排毒量和脏器病毒载量,发现对照组的排毒量显著高于免疫组。对照组水貂心脏、肝脏、直肠和淋巴结的病毒载量均显著高于免疫组,且对照组水貂的心脏和淋巴结病毒载量最高。综上所述,本研究在5 L转瓶培养rCDV-3的增殖能力较强,并可诱导小鼠和水貂产生高水平的保护性体液免疫应答,并能够保护水貂抵抗CDV强毒攻击。表明,rCDV-3扩大培养后滴度高,为犬瘟热疫苗的进一步提质增效奠定基础。
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