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猪流行性腹泻病毒兔多克隆抗体的制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 方树人;蔡佳希;李子树;王毓;方晓寒;曹欣;薛向红

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病毒;兔多抗;中和活性

期刊名称：经济动物学报

ISSN： 1007-7448

年卷期： 2025 年

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收录情况： 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为了探究兔多克隆抗体在猪流行性腹泻病毒检测和鉴定中的有效性。本研究通过Vero细胞大量培养了猪流行性腹泻病毒（PEDV），并利用蔗糖密度梯度离心法对其进行了浓缩纯化。以纯化后的PEDV免疫新西兰白兔四次，采集收获了大量PEDV兔血清，用饱和硫酸铵沉淀法对其进行粗提，再用亲和层析法纯化得到PEDV兔多抗。ELISA检测结果显示，PEDV兔多抗的ELISA效价为1∶32000。间接免疫荧光试验结果表明，PEDV兔多抗能够识别PEDV-XD（G2a型）株、PEDV G1型CV777株，但不与猪其他易感病原猪瘟病毒C株（CSFV-C）、猪伪狂犬病毒K61株（PRVbartha-K61）发生反应，这提示，本研究制备的PEDV兔多抗具有检测的广谱性和特异性。Western blot鉴定结果显示，PEDV兔多抗能够与PEDV G2a和G1型的核衣壳蛋白N、刺突蛋白S、膜蛋白M发生特异性识别，其中，对N蛋白识别信号最强。此外，PEDV兔多抗具有体外中和活性，对PEDV-XD（G2a型）株的中和IC50为1.418μg/mL，对G1型CV777株的中和IC50为5.524 μg/mL，这表明PEDV兔多抗具有治疗潜力。综上，本研究为PEDV检测和鉴定提供了经济高效的多抗试剂，为PEDV治疗性抗体开发奠定了基础。

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