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利用InlB蛋白检测小鼠血清中产单核细胞李氏杆菌抗体的间接ELISA建立

文献类型： 中文期刊

作者： 宁文晴;樊沪成;张文鑫;杨晓雯

作者机构：

关键词： 产单核细胞李氏杆菌;InlB蛋白;间接酶联免疫吸附试验

期刊名称：畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2026 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 旨在建立一种快速有效的检测产单核细胞李氏杆菌感染样品的间接ELISA方法。本研究采用原核表达系统体外诱导表达InlB蛋白，通过优化并确定间接ELISA方法的最佳参数，建立间接ELISA方法。本研究发现，利用pColdⅡ-10 × His载体能够可溶性表达InlB蛋白；棋盘法优化后的条件为InlB蛋白包被浓度为4 μg·mL-1，10%脱脂奶粉室温封闭2 h，血清最适稀释倍数为1:400，37℃孵育1 h，酶标二抗最佳稀释度为1:2 500，37℃避光显色8 min，阴阳性临界值为0.37。本研究建立的间接ELISA方法仅与产单核细胞李氏杆菌阳性血清反应，当血清稀释度为1:800时检测仍为阳性；批内重复变异系数为2.79%～6.64%，批间重复的变异系数为2.61%～7.75%，重复性好；与商品化试剂盒相比，整体符合率为95.83%。本研究建立的LM感染样品的间接ELISA检测方法特异性强，敏感性高，可用于产单核细胞李氏杆菌感染样品的快速检测，为李斯特菌病的监测提供参考。

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