羊种布鲁氏菌链霉素耐受基因筛选及鉴定
文献类型: 中文期刊
作者: 周师众;袁雅琴;宁文晴;薛天骐;杨晓雯;丁家波
作者机构:
关键词: 羊种布鲁氏菌;链霉素;Ⅳ型分泌系统;VirB操纵子
期刊名称:微生物学通报
ISSN: 0253-2654
年卷期: 2024 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2023-2024年度) ; ; 科技核心(2024版)
摘要: 【背景】布鲁氏菌(Brucella spp.)是一种兼性胞内寄生菌,能够引起世界范围内的人兽共患流行病——布鲁氏菌病(以下简称布病)。链霉素是治疗布病的推荐药物,但我国已有链霉素耐受分离株(根据CLSI推荐的耐药折点)。【目的】筛选并鉴定羊种布鲁氏菌链霉素耐受的新基因。【方法】利用转录组筛选羊种布鲁氏菌链霉素耐受新基因,并利用同源重组、分子对接等技术预测并鉴定相关基因的功能。【结果】羊种布鲁氏菌(M5疫苗株)在含2×MIC (minimum inhibitory concentration) 浓度链霉素培养基上,12 h后通过耐受恢复增殖能力。转录组分析表明,细胞膜组成成分在低浓度链霉素耐受中发挥重要作用,核糖体通路相关基因表达量显著性增加[Fold Change (FC) ≥ 2.0,P<0.05],群体感应通路、Ⅳ型分泌系统相关基因表达量显著性降低(FC≥2.0,P<0.05)。利用同源重组技术缺失组成Ⅳ型分泌系统的元件,发现缺失virB3和virB5基因后M5疫苗株链霉素MIC值增高,回补后与亲本株差异不显著。分子对接预测发现,virB3和virB5基因能够通过氢键与链霉素结合。【结论】链霉素主要影响羊种布鲁氏菌细胞膜组分涉及的相关通路。羊种布鲁氏菌通过降低Ⅳ型分泌系统组成元件virB3和virB5基因的表达耐受链霉素。本研究为布鲁氏菌耐药株研究提供了新思路,为布鲁氏菌新药研发提供了候选靶点。
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