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猪流行性腹泻病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 董苏洁;孔宁;秦文珍;翟焕杰;翟雪滢;杨心雨;童武;郑浩;于海;童光志;李有文;单同领

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病毒;N基因;SYBR Green I;荧光定量PCR

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2022 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）

摘要： 为了建立高效、灵敏的猪流行性腹泻病毒（PEDV）检测方法，本研究从GenBank数据库中获取PEDV N基因序列，扩增出PEDV N基因标准质粒，并在N基因的保守区域内设计了一对特异性荧光定量引物，成功建立了SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。经过一系列试验表明，该检测方法线性关系良好，R2值为0.99；特异性强，敏感性高，最低可检测至2.23拷贝/μL， 比普通PCR灵敏约100倍；重复性好，组内变异系数在0.25%～0.43%之间，组间变异系数在0.67%～0.97%之间；对于各地区96份临床样品检测出PEDV阳性率为25%。本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法为PEDV的临床诊断、流行病学调查以及定量研究提供了有效的检测工具。

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