文献类型： 中文期刊
作者： 梁浩;孙海;邵财;钱佳奇;张亚玉
作者机构：
关键词： 人参;转录因子;生物信息学;亚细胞定位;表达分析
期刊名称：中草药
ISSN： 0253-2670
年卷期： 2023 年
页码：
收录情况： 北大核心（2020版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2023版）
摘要： 目的克隆人参Panaxginseng转录因子基因PgWRKY22，进行生物信息学、亚细胞定位及外源磷胁迫表达分析。方法根据人参转录组数据库设计特异性引物，PCR扩增PgWRKY22全长cDNA序列，命名为PgWRKY22，并对其进行生物信息分析；构建绿色荧光融合表达载体PgWRKY22-eGFP，利用农杆菌侵染烟草叶片的瞬时表达法分析亚细胞定位；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测PgWRKY22在植物组织中的表达特异性以及在外源磷作用下的表达模式。结果人参转录因子基因PgWRKY22的cDNA序列为975bp，编码324个氨基酸；PgWRKY22蛋白属于WRKY超家族蛋白，具有典型的WRKY结合域，该蛋白不稳定，属于亲水性蛋白，无规则卷曲为主要组成部分；PgWRKY22蛋白与丹参SmWRKY、葡萄VvWRKY22、长春花CrWRKY22、独脚金SaWRKY27蛋白具有较高的同源性，与西洋参PqWRKY1、PqWRKY2，人参PgWRKY1、PgWRKY3、PgWRKY4具有较近的系统发育关系；亚细胞定位显示PgWRKY22定位于细胞核上；实时荧光定量PCR表明PgWRKY22在人参的侧根和主根中表达较高，在叶和茎中次之；在外源磷浓度为2mmol/L浓度下的表达显著高于其他磷浓度下的表达。结论 克隆获得PgWRKY22的cDNA序列及表达信息，可为后续进行基因功能鉴定和人参栽培的磷营养调控提供参考。
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