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禽流感病毒H1N1亚型NA蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 吕雪华;牛世奇;潘晟辉;张云翔;潘学;张志飞;许榜丰;闫鸣昊;闫大为;滕巧泱;苑纯秀;李泽君;刘芹防

作者机构：

关键词： NA蛋白;单克隆抗体;中和活性

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 流感病毒是分节段的负链RNA病毒，高致病性禽流感病毒可导致严重的致死性疾病，已给全球禽类养殖及相关产业造成了巨大损失，并对人类健康造成了极大威胁，流感病毒表面的NA蛋白与流感病毒的功能息息相关，NA蛋白由RNA片段6编码，NA蛋白的主要作用是在新生病毒粒子从细胞膜表面出芽的阶段切割病毒和细胞膜糖蛋白的SA结合以避免病毒粒子的聚集从而从被感染细胞表面释放。为获得NA单克隆抗体为后续实验提供帮助，本实验以H1N1-WSN-NA蛋白质粒作为免疫原免疫小鼠，取高血清效价的小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合，通过构建真核表达重组质粒pCAGGS-NA转染293T细胞来瞬时表达NA蛋白作为检测原，并用间接免疫荧光试验（IFA）和WB（Western-blot）试验筛选阳性杂交瘤细胞，最终得到2株识别NA蛋白的单克隆抗体细胞，分别命名为2F1-37-5和3G7-50-7，其中2F1-37-5展现出1:128倍比稀释度的中和活性，说明本试验成功制备出具有高纯度、强特异性、良好反应性的NA蛋白单克隆抗体，为流感病毒防治研究提供了重要工具。

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