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新型鸭呼肠孤病毒单克隆抗体的制备及阻断ELISA抗体检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 阿茹恒;陈婷;莫斯雯;闫大为;许榜丰;刘芹防;滕巧泱;石晓娜;张志飞;潘学;闫鸣昊;李泽君;苑纯秀;周伟光

作者机构:

关键词: NDRV;μB蛋白;单克隆抗体;阻断ELISA

期刊名称:中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2025 年

页码:

收录情况: 北大核心(2023版) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)

摘要: 为了建立快速检测新型鸭呼肠孤病毒( NDRV )抗体的阻断ELISA方法,本研究以浓缩NDRV为抗原免疫小鼠,用细胞融合技术制备单克隆抗体。以IFA和阻断ELISA双重筛选,获得一株能稳定分泌NDRV特异性单抗的细胞株9B11,9B11分泌单抗能被NDRV阳性血清产生高阻断率。经IFA和Western blot鉴定,9B11分泌抗体针对NDRV μB蛋白。μB-9B11具有中和NDRV的活性,中和效价达1︰518。以μB-9B11为一抗建立了NDRV阻断ELISA抗体检测方法,经评价该方法与鸭肝炎病毒(DHAV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、鸭瘟病毒(DEV)、鸭细小病毒(DPV)、鸭圆环病毒(DUCV)和鸭腺病毒(DAdV)等常见水禽病毒的阳性血清均无交叉反应;最低能检出1︰1600稀释的阳性血清;批内和批间变异系数(Cv)均小于10%;通过对126份阴阳性血清进行检测,该方法与IFA的符合率达93.7%;评估结果表明本研究建立的阻断ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和可重复性,且操作简便,适用于临床NDRV抗体检测,可作为NDRV 疫苗的免疫效果评估及疫病防控的重要工具。

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