文献类型： 中文期刊
作者： 祝宇翔;邢燕茹;王娟;刘清艳;陈荣琳;高硕磊;李健楠;周艳君;单同领;童武;郑浩;刘长龙;姜一峰;孔宁;童光志;于海;汪秀会
作者机构：
关键词： 原核表达;PRRSV;GP3蛋白;ELISA
期刊名称：中国动物传染病学报
ISSN： 1674-6422
年卷期： 2024 年
页码：
收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）
摘要： 猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是当前全球养猪业面临的重大疾病之一，主要导致患病妊娠母猪在妊娠后期出现流产、死胎和木乃伊胎等症状，同时还会引起仔猪死亡。研究发现，GP3蛋白中含有中和抗体表位，并且与机体的保护性免疫相关。为了获取猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的GP3蛋白，本研究以一株PRRSV的cDNA为模板，设计引物并采用PCR扩增目的片段，将其连接至 p Cold-I上，获得重组质粒pCold-I-GP3，诱导表达后，通过SDS-PAGE鉴定，成功表达带有His标签的蛋白GP3蛋白，并纯化得到浓度为0.5 mg/mL的纯化蛋白。结果显示，GP3蛋白以包涵体形式表达，分子量约为25.85 kDa。建立的间接ELSIA方法的批间及批内变异系数均小于10%，且对PRRS阳性血清具有特异性。本研究通过原核表达获得GP3截短蛋白，并基于该蛋白及其多克隆抗体成功建立了一种检测PRRS阳性血清的间接ELISA检测方法。
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