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抗口蹄疫病毒分泌型IgA抗体的构建表达及特性研究

文献类型: 中文期刊

作者: 刘锋;李坤;马雪青;欧阳一凡;孙普;章兴赜;曹轶梅;白兴文;袁红;李凤娟;刘在新;卢曾军;李平花

作者机构:

关键词: 口蹄疫病毒;分泌性IgA抗体;构建表达;特性研究

期刊名称:微生物学报

ISSN: 0001-6209

年卷期: 2025 年

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收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2025-2026年度) ; ; 科技核心(2024版)

摘要: 【目的】制备抗口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)分泌性IgA (secretory IgA, sIgA)抗体,为口蹄疫(foot-and-mouth disease, FMD)的综合防控提供新思路和前期基础。【方法】以实验室前期筛选的一株抗O型和A型FMDV的IgG型中和抗体POA-8为模板,用猪IgA重链的恒定区基因(经密码子优化)替换IgG重链的相应区域,构建抗FMDV IgA抗体的重链真核表达质粒;同时分别构建含猪源J链和分泌片(secretory component, SC)的真核表达质粒,以及同时含IgA抗体的重链、轻链和J链基因的真核表达质粒。采用4质粒(重、轻、J和SC)或2质粒(重+轻+J+SC)分别瞬时共转染CHO-S悬浮细胞,进行抗FMDV sIgA抗体的组装表达。表达的sIgA抗体经纯化后,通过SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定,并利用间接ELISA和微量病毒中和实验评价sIgA抗体与FMDV的结合活性和中和活性。【结果】四质粒或2质粒共转染CHO-S细胞后,均能成功组装表达抗FMDV的sIgA抗体,且sIgA抗体对O型和A型FMDV的结合能力及中和能力均强于IgG抗体。【结论】本研究成功构建了抗FMDV sIgA抗体的表达系统,为未来FMD黏膜疫苗和抗病毒药物的开发奠定了前期基础。

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