超声波辅助农杆菌介导棉花茎尖遗传转化体系的优化
文献类型: 中文期刊
作者: 刘金伟;李燕;姚金波;陈伟;朱守鸿;潘敬文;梅拥军;张永山
作者机构:
关键词: 棉花;遗传转化;茎尖分生组织;超声波;激素
期刊名称:分子植物育种
ISSN: 1672-416X
年卷期: 2024 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 为建立高效的超声波辅助根癌农杆菌介导的棉花遗传转化体系,本研究以棉花品种TM-1种子中剥取的茎尖分生组织为材料,通过对超声处理参数、卡那霉素浓度、共培养时间、激素处理等影响因素进行优化,获得丛生芽转基因植株。结果显示:以浸泡24 h棉花种子的茎尖分生组织为受体,使用功率为150 W,频率为59 kHz的超声波处理1 min,利用含有eGFP荧光蛋白基因的重组农杆菌侵染转化,共培养3 d时eGFP瞬时表达量最高,在MSB培养基中添加卡那霉素浓度150 mg/L,6-BA 2mg/L、KT 2mg/L和IBA 0.5 mg/L 培养基更适合诱导抗性丛生芽,经eGFP绿色荧光和PCR检测鉴定为转基因阳性植株。本研究为提高以棉花茎尖为外植体的高效遗传转化提供技术参考。
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