犬β防御CBD122原核表达及其抗病毒活性研究
文献类型: 中文期刊
作者: 任艳蓉;李传峰;孟春春;朱杰;赵建军;刘光清
作者机构:
关键词: 犬防御素;原核表达;大肠杆菌;抗病毒;活性
期刊名称:中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2022 年
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; 科技核心(2021版) ; 农林核心(2020版)
摘要: 防御素为抗菌肽家族成员,且具有良好的抗菌抗病毒功能。由于抗生素的大量使用其作用已大大降低,而防御素具有良好的抗病毒应用前景,因此本研究将犬β防御素CBD122利用大肠杆菌表达,重组蛋白rCBD122经纯化后在体外细胞上进行抗重组水泡性口炎病毒(rVSV-GFP)和犬瘟热病毒(CDV)活性测定,从而评价重组蛋白抗病毒效果。研究结果显示,37℃诱导5h,IPTG浓度为0.5 mmol/L时rCBD122表达量较高,且大量表达于菌体破碎后菌液上清,纯化后表达量为0.22 mg/mL。rCBD122抗rVSV-GFP和CDV感染活性测定结果显示,rCBD122抗VSV-GFP病毒效价为1.17×104 IU/mL;rCBD122抗CDV感染效价为2.34×104 IU/mL。rCBD122可在24 h特异性抑制CDV野毒株SD(14)7在易感细胞上的复制水平(P<0.01),与病毒感染组相比,病毒RNA载量下降16.31倍。因此,本研究应用大肠杆菌表达系统成功表达了重组蛋白rCBD122,且其具有较好的抗病毒活性,为后续防御素作用机制研究以及新型抗病毒治疗药物研发奠定了基础。
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