伪狂犬病病毒UL36蛋白单克隆抗体的制备和鉴定
文献类型: 中文期刊
作者: 陈玲超;王兴娅;李俊波;李佳佳;王晨;李松楠;王安铖;孟鑫;童武;孔宁;于海;单同领;童光志;郑浩
作者机构:
关键词: 伪狂犬病病毒;UL36基因;VP1/2;单克隆抗体
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2023 年
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; ; CSCD(2023-2024年度) ; ; 科技核心(2023版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 伪狂犬病病毒UL36基因编码的皮层蛋白VP1/2在病毒粒子组装过程中发挥重要作用。本试验以UL36基因为研究对象,将截短的UL36基因克隆入pCold I载体,构建了重组原核表达质粒pCold I-UL36。经诱导表达,将包涵体形式表达的重组蛋白经过变性、亲和层析及复性后获得了纯度较高的蛋白。将纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合和间接ELISA方法筛选出1株能稳定分泌针对UL36蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,被命名为UL36-6,抗体亚型鉴定结果为IgG1和κ,制备的腹水抗体中和效价及纯度高,Western- blot和间接免疫荧光试验结果表明单克隆抗体具有很好的特异性。综上所述,本研究成功制备出1株针对PRV UL36蛋白的单克隆抗体,为深入研究UL36蛋白的生物学功能奠定了基础。
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