通过定向进化技术提高角蛋白酶的热稳定性研究
文献类型: 中文期刊
作者: 傅岩;张铁鹰;孙英霞;李松育
作者机构:
关键词: 角蛋白酶 ; 定向进化 ; 热稳定性
期刊名称:动物营养学报
ISSN: 1006-267X
年卷期: 2021 年 33.0 卷 10.0 期
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2020-2021年度) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)
摘要: 本试验旨在通过定向进化技术提高角蛋白酶的热稳定性,以拓展角蛋白酶在饲料工业的适用性.试验采用易错PCR方法对地衣芽孢杆菌CP-16的角蛋白酶进行定向进化,筛选获得耐温性好的突变体,并对其进行酶学性质研究与结构功能分析.结果 表明,从5000个突变体中获得3株正向角蛋白酶突变体A307V/S346T、R70G、N245K,其角蛋白酶热稳定性得到了提高.酶学性质研究发现,角蛋白酶突变体R70G热稳定性最强,在75℃热处理5 min后残留酶活性达30.65%,而野生型角蛋白酶热处理5 min后残留酶活性仅1.06%.由此可见,本研究成功获得热稳定性较好的角蛋白酶突变体,拓展了角蛋白酶的适用性,为耐热角蛋白酶开发和相关基因信息探索提供了参考.
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