文献类型： 中文期刊
作者： 罗平;高宇杰;张晓荟;张宁;韩先干;宋厚辉;韩月;程昌勇
作者机构：
关键词： 禽致病性大肠杆菌;脂多糖（LPS）;O抗原侧链;岩藻糖;糖基合成酶
期刊名称： 中国预防兽医学报
ISSN： 1008-0589
年卷期： 2023 年
页码：
收录情况： 北大核心（2020版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2023版） ; ; 农林核心（2020版）
摘要： 为研究O抗原侧链岩藻糖合成酶fdtACB基因簇对禽致病性大肠杆菌（APEC）生物学特性的影响,本研究以O2血清型APEC DE17为亲本株，通过Red同源重组构建fdtACB基因缺失株与回补株，经PCR鉴定及测序证明缺失株ΔfdtACB和回补株CΔfdtACB构建成功。使用硝酸银染色和western blot鉴定细菌LPS图谱和血清反应性，银染结果显示，ΔfdtACB缺失株没有产生与野生株一样的完整的脂多糖图谱，表现为部分O抗原梯状条带缺失和移位；Western blot结果显示，ΔfdtACB与大肠杆菌O2血清型O因子血清无反应条带。生长曲线测定结果显示，fdtACB与野生株和回补株的生长速率无明显差异（P＞0.05）。通过分析菌株的运动性和生物被膜形成能力发现，ΔfdtACB缺失株的运动能力显著降低（P＜0.01），生物被膜形成能力显著升高（P＜0.01）。以上结果表明fdtACB影响细菌O抗原完整性，介导细菌运动和生物被膜形成。使用DF-1细胞检测APEC对细胞的黏附入侵能力发现，ΔfdtACB对DF-1细胞的黏附及入侵能力均较野生株降低（P＜0.01）。随后以大蜡螟为模型评价细菌致病力，以不同浓度的菌液感染大蜡螟，观察5 d内各组大蜡螟存活率并计算LD50，结果显示，野生株LD50为1.85×10~2cfu，缺失株LD50为9.16×10~2cfu，回补株LD50为8.0×10~1cfu，缺失株致病力比野生株降低约5倍。以上结果表明fdtACB影响细菌感染和致病。综上，本研究表明大肠杆菌岩藻糖合成酶FdtACB参与O2型APEC的O抗原合成，在细菌运动、生物被膜形成和感染过程中发挥作用，该结果对完善APEC O抗原侧链的生物学功能具有重要意义。
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