亚洲棉(GossypiumarboreumL.)全生育期均一化全长cDNA文库的构建和鉴定
文献类型: 中文期刊
作者: 王玉荣;张雪妍;刘传亮;陈亚娟;李付广
作者机构:
关键词: 亚洲棉;全生育期;均一化;cDNA文库;EST
期刊名称:中国农业科学
ISSN:
年卷期: 2009 年 04 期
页码: 1158-1164
收录情况: CSCD
摘要: 【目的】构建二倍体亚洲棉石系亚1号全生育期均一化全长cDNA文库,建立亚洲棉功能基因组学研究基础平台,发掘亚洲棉发育、抗逆等相关基因。【方法】取石系亚1号子叶期、苗期、蕾期、花铃期不同组织器官,提取总RNA并分离纯化mRNA,采用SMART技术反转录全长双链cDNA。用DSN(duplex-specificnuclease)法对全长双链cDNA进行均一化,均一化的cDNA连接到λZAPⅡ载体,包装蛋白包装后构建石系亚1号全生育期均一化全长cDNA文库。【结果】初级文库滴度4×106pfu·ml-1,库容2×106个独立克隆,重组率大于95%,插入片段平均长度大于1.5kb。随机挑取192个克隆...
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