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Rv1140蛋白酶在结核分枝杆菌感染中的作用研究

文献类型： 中文期刊

作者： 郭若男;姜艳艳;陈春文;段祎凡;高云洁;张镇钧;冯婷婷;王慧;李梦雨;聂蝉蝉;崔莹莹;党光辉;刘思国

作者机构：

关键词： 结核分枝杆菌;蛋白酶;Rv1140;免疫反应;候选抗原

期刊名称：黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2026 年 01 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为了进一步了解Rv1140蛋白酶在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染中的功能，试验采用同源重组方法构建MTB H37Ra rv1140基因缺失菌株(ΔRv1140菌株)及MTB H37Ra rv1140基因回补菌株(ΔRv1140+Rv1140菌株)，并采用PCR和Southern-blot方法进行鉴定;绘制MTB H37Ra菌株、ΔRv1140菌株和ΔRv1140+Rv1140菌株的生长曲线;利用H37Ra菌株感染巨噬细胞后采用实时荧光定量PCR(q PCR)方法检测感染后rv1140转录水平;利用MTB H37Ra菌株、ΔRv1140菌株和ΔRv1140+Rv1140菌株感染小鼠腹腔巨噬细胞，采用q PCR方法检测炎性细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因的转录水平及胞内定殖情况。结果表明:成功构建出ΔRv1140菌株及ΔRv1140+Rv1140菌株; Rv1140蛋白酶的缺失并不影响H37Ra的生长;与感染前相比，H37Ra菌株感染巨噬细胞第48,72小时，rv1140基因的mRNA相对表达量极显著升高(P<0.001);感染U937细胞第24,48,72小时，rv1140基因的mRNA相对表达量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01、P<0.001)。与ΔRv1140菌株感染小鼠腹腔巨噬细胞相比，感染H37Ra菌株和ΔRv1140+Rv1140菌株第12小时，IL-1β mRNA相对表达量极显著升高(P<0.001)，第6,12小时后，H37Ra菌株和ΔRv1140+Rv1140菌株感染的IL-6和TNF-α mRNA相对表达量极显著升高(P<0.01或P<0.001)。说明Rv1140蛋白酶不仅参与调节宿主免疫反应，还与MTB在巨噬细胞内的定殖能力呈现负相关的关系。

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