数字农科院2.0

基于环介导等温扩增技术检测烟草疫霉菌

文献类型： 中文期刊

作者： 朱百佳;刘晓宇;李昕建;韦兴启;罗有江;刘垦;游安弟;雷庭;王杰;罗倩茜

作者机构：

关键词： 环介导等温扩增;烟草疫霉;烟草黑胫病;SUPER GreenⅠ;检测技术

期刊名称：生物灾害科学

ISSN： 2095-3704

年卷期： 2025 年 48 卷 1 期

页码：

收录情况： 无来源刊（2025版）

摘要： 【目的】应用环介导等温核酸扩增技术(loop-mediated isothermalamplification,LAMP)建立基于颜色判定的简单、快速、灵敏并具有通用性的烟草疫霉(Phytophthora parasitica var. nicotianae)检测方法,为该病害的风险预判和防治提供依据。【方法】以PUF蛋白编码基因PpPuf4为靶序列,设计并筛选得到一组烟草疫霉菌特异性LAMP引物,建立了一种快速有效的LAMP检测体系。通过实验对该检测方法的特异性、灵敏度、通用性进行了评估,并对其实际应用效果进行了验证。【结果】在62℃恒温条件下进行扩增反应,反应结束后加入荧光染料SUPERGreenI作为显色剂,特异性检测结果显示,只有烟草疫霉菌株的LAMP反应液为阳性(黄绿色),另外14株其他烟草常见真菌病原菌反应液为阴性。灵敏度试验结果显示,最低能检测到烟草疫霉的DNA浓度为1 pg/μL。通用性结果显示18株不同地区来源的烟草疫霉菌均可被检出。人工接种发病组织和田间黑胫病烟株的检测结果均呈阳性,与组织分离法对烟草疫霉的检测结果相一致。【结论】该检测方法的建立,可用于田间烟草黑胫病的快速、简单、有效地检测,有利于烟草黑胫病的及时发现和防控。

分类号：

  • 相关文献

[1]烟草疫霉拮抗菌的分离鉴定及其生防和发酵特性. 曾祥难,刘新源,彭博,谢冰悦,杨英杰,尤祥伟,李义强,韦建玉. 2024

[2]甜椒根腐病防治药剂效果比较. 王满意,李宝聚,张薇,石延霞,张宗俭. 2006

[3]烟草疫霉拮抗菌株P-72-10的鉴定及其拮抗代谢产物初步分析. 董国菊,李文英,刘翠平,周常勇,肖崇刚. 2012

[4]抗烟草疫霉活性木霉与芽孢杆菌共培养体系的构建与优化. 张希芬,林伟,李清钰,刘荣欣,刘建阳,王美,丁应福,赵栋霖,张成省. 2022

[5]环介导等温扩增技术在兔出血症病毒检测中的应用. 原冬伟,刘家森,郭东春,姜骞,林欢,司昌德,曲连东. 2013

[6]转cry1Ac基因抗虫水稻环介导等温扩增检测方法的建立及应用. 李志辉,王志鑫,张先舟,张伟,檀建新,束长龙,张杰,张永军. 2013

[7]绵羊肺腺瘤LAMP快速诊断方法的初步建立(英文). 刘霄卉,于立新,罗军荣,周艳喜,刘畅,幺宏强,周建华,马学恩. 2013

[8]环介导等温扩增技术在畜牧兽医领域的应用. 彭永刚,孙恩成,刘飞,刘春国. 2010

[9]环介导等温扩增技术在转基因成分检测中的应用. 冀国桢,李刚,赵建宁,杨殿林,修伟明. 2016

[10]环介导等温扩增技术原理及其在检测诊断病原微生物中的应用. 焦文强,殷相平,柳纪省. 2009

[11]牛副结核分枝杆菌LAMP快速检测方法的建立. 王建峰,黄素文,刘思国,倪建波,王春,张吉红,于纪棉,朱堂明,黄绍棠. 2012

[12]应用三磷酸核苷水解酶基因检测弓形虫方法的建立. 王萌,王艳华,蔡志杰,付宝权,李文卉,张德林. 2010

[13]植物青枯菌LAMP检测方法的建立. 徐进,张昊,许景升,丁伟,冯洁. 2016

[14]减蛋综合征病毒环介导等温扩增检测方法的建立. 董春娜,李刚,李伟,张坤,史利军,哈小琴,胡永浩. 2011

[15]非洲猪瘟病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立. 江彦增,朱鸿飞. 2009

[16]抗草甘膦转基因大豆及其加工产品的环介导等温扩增检测技术. 田芳,王秀敏,滕达,杨雅麟,管庆丰,敖长金,王建华. 2011

[17]犬副流感病毒反转录-环介导等温扩增检测方法的建立. 王凤雪,程世鹏,温永俊. 2016

[18]检测创伤弧菌两种毒力基因的环介导等温扩增检测方法的建立. 别闯南,王权,白雪瑞,凌娇,李恭贺,蒋蔚. 2018

[19]环介导等温扩增技术检测山羊奶中的牛奶成分. 李婷婷,赵路遥,张桂兰,赵晓燕,赵志勇,陈爱亮. 2018

[20]环介导等温扩增技术在转基因饲料成分检测中的应用. 田芳,王秀敏,滕达,杨雅麟,敖长金,王建华. 2010

作者其他论文 更多>>