牛病毒性腹泻病毒重组酶聚合酶扩增结合侧流层析试纸条(RPA-LFD)快速诊断方法的建立与应用
文献类型: 中文期刊
作者: 杨森;王倩颖;刘可欣;王超;谭斌;刘俊峰;胡建军;张淑琴
作者机构:
关键词: 牛病毒性腹泻病毒;重组酶聚合酶扩增;侧流层析;快速诊断方法
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2022 年
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2020-2021年度) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)
摘要: 本研究开发了一种基于重组酶聚合酶扩增(RPA)技术结合侧流层析试纸条(LFD)快速检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的方法。该方法根据5′-UTR保守序列设计nfo RPA特异性引物和探针,35 ℃孵育25 min即可完成对BVDV核酸的识别与扩增,室温条件下仅需5 min便可肉眼在试纸条上观察到结果。结果显示,该方法最低检测限为60 copies/μL,且仅能够检测出BVDV1型和2型,与猪瘟病毒(CSFV)、传染性牛鼻气管炎病毒(IBRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)等其他病毒无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。对临床样本的检测结果表明,该方法的测定性能与RT-qPCR一致,且RPA-LFD操作更加快速便捷,更适合现场环境中使用。
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