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家榆UpNOA1的克隆及其互作蛋白的筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 刘晓天;何毓琦;刘畅;薛华

作者机构：

关键词： 家榆;NOA1;组织特异性表达;PULL DOWN;互作蛋白

期刊名称：生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： EI（2025版） ; ; 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 【目的】一氧化氮相关蛋白NOA1与植物体内NO水平有关，可能参与植物多种生理活动。克隆UpNOA1，分析其在家榆各组织中的表达情况，筛选与UpNOA1互作的蛋白，为研究家榆UpNOA1的功能提供依据。【方法】以家榆（Ulmus pumila L.）为试验材料，克隆UpNOA1基因，运用生物信息学分析其结构域、进化树等，采用RT-qPCR分析UpNOA1的组织特异性表达情况。构建载体进行原核表达分析，获得纯化UpNOA1蛋白。利用His-PULL DOWN筛选并初步分析UpNOA1的互作蛋白。【结果】家榆UpNOA1编码区全长1 698 bp，共编码565个氨基酸，包含1个保守的GTP/Mg2+结合位点。经预测，UpNOA1蛋白定位于叶绿体。UpNOA1蛋白与美国榆UaNOA1蛋白序列同源性最高。RT-qPCR分析发现，UpNOA1在叶片中表达量最高，种子次之。经HisPULL DOWN筛选，共获得131个UpNOA1互作蛋白，且与遗传信息处理相关的核糖体蛋白最多。经比对，有25个蛋白与抗逆和GTP相关。【结论】克隆获得UpNOA1，在叶片中表达量最高，种子次之。鉴定到131个UpNOA1互作蛋白，其中有25个蛋白与抗逆和GTP相关。

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