靶向伪狂犬病病毒UL35基因的SYBR Green I荧光定量PCR方法的建立
文献类型: 中文期刊
作者: 张心雨;吴红霞;李永锋;孙元;付强;仇华吉
作者机构:
关键词: 伪狂犬病病毒;UL35基因;SYBR Green I;定量PCR
期刊名称:中国兽医学报
ISSN: 1005-4545
年卷期: 2024 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2023-2024年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 为了确定UL35基因能否作为诊断伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)感染的靶标,本研究根据PRV不同毒株UL35基因保守序列,设计合成特异性荧光定量PCR引物,扩增长度为54 bp的片段。通过优化反应条件和反应体系,结果显示,建立的PRV SYBR Green I荧光定量PCR检测方法具有良好的重复性和特异性,其标准曲线与模板浓度呈现良好的线性关系;对猪繁殖和呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)核酸扩增均呈阴性;将所建立的方法与同类方法进行比较,敏感性无差异;组间和组内重复性试验的变异系数小于2%。用本研究所建立的方法对PRV感染小鼠的组织样品进行检测,均检测到一定的病毒载量。结果表明,UL35基因可以作为诊断PRV感染的靶标。
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