文献类型： 中文期刊
作者： 李明智;吴红霞;王异民;孙元
作者机构：
关键词： 伪狂犬病病毒;慢病毒载体;UL54基因;PK-15细胞
期刊名称：中国兽医学报
ISSN： 1005-4545
年卷期： 2025 年 6 期
页码：
收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）
摘要： UL54蛋白是伪狂犬病病毒(pseudo rabies virus,PRV)的非结构蛋白.电镜观察结果显示,多数UL54基因缺失的重组PRV(rPRV-△UL54)的病毒粒子仅有核衣壳,缺少完整的囊膜结构.病毒粒子结构的不完整导致病毒的感染效率显著降低,无法用于对UL54的基因功能及作用机制的研究.本研究将UL54基因克隆至慢病毒载体pLVX-IRES-Puro,经慢病毒转导后,PK-15细胞表达UL54蛋白.通过PCR、间接免疫荧光试验及蛋白质免疫印迹法进行鉴定,成功构建了过表达UL54蛋白的细胞株(PK-15-UL54).在PK-15-UL54细胞株中接种UL54基因缺失病毒(rPRV-△UL54-Re)后,检测其复制情况.电子显微镜观察显示,rPRV-△UL54-Re病毒具有完整的病毒粒子结构;荧光显微镜观察结果表明,rPRV-△UL54-Re病毒能够正常感染细胞并进行复制;定量PCR检测结果表明,rPRV-△UL54-Re病毒的复制效率有所提高.因此,PK-15-UL54细胞株是提高UL54基因缺失重组PRV复制效率的重要工具,可在探究UL54基因调控PRV复制机制的研究中发挥重要作用.
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