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抗猪瘟病毒Ribozyme基因表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 王敏华;段小波;赵启祖;谢庆阁;范必勤

作者机构：

关键词： 猪瘟病毒；Ribozyme；克隆与鉴定；聚合酶链式反应

期刊名称：江苏农业学报

ISSN： 10004440

年卷期： 1994 年 03 期

页码：

摘要： 根据猪瘟病毒（ＨＣＶ）基因组ＲＮＡ的序列和Ｒｉｂｏｚｙｍｅ的结构特点，设计并合成了针对ＨＣＶ基因组Ｐ（８０）编码区长为５６碱基对（ｂｐ）的榔头状ＨＣＶＲｉｂｏｚｙｍｅ（ＨＲ）基因。将此基因插入质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ中，转化ＸＬ１－ｂｌｕｅ细胞，经限制性内切酶鉴定，获得６个阳性克隆ｐＢＨＲ。可用于ＨＣＶ抗性的体外表达研究。又将羊金属巯因启动子（ｏＭＴ－ｐｒｏｍｏｔｅｒ）插入ｐＢＨＲ，构建重组质粒ｐｏＭＨＲ，经序列分析插入的ＨＲ基因序列和方向与设计相符。再将ｏＭＴＨＲ基因插入质粒ｐｍＭＴ中，最终构成ｐＭＨＲ表达载体，经酶切分析和聚合酶链式反应（ＰＣＲ）鉴定表为此表达载体中确含ｏＭＴ启动子和ＨＣＶ－Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因，可用于ＨＣＶ抗性的体内表达研究。

分类号： S858.285.3

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