文献类型： 中文期刊
作者： 张小丽;卢曾军;马小军;曹轶梅;付元芳;刘在新;谢庆阁
作者机构：
关键词： 口蹄疫病毒;2C基因;昆虫杆状病毒;表达;应用
期刊名称：畜牧兽医学报
ISSN： 0366-6964
年卷期： 2011 年 42 卷 12 期
页码： 1724-1731
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 研究口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)2C在区分灭活疫苗免疫动物与自然感染动物方面的意义。本研究将FMDV NSP 2C基因,克隆到穿梭载体pFast-bac-HT-B,将其转入含骨架载体Bacmid的DH10Bac,经蓝白斑筛选得到重组骨架质粒Bacmid-2C。将Bacmid-2C转染昆虫细胞Sf9,鉴定正确后,经3次增殖获得高滴度的P-3代病毒后,在High Five细胞中进行目的蛋白的表达。SDS-PAGE结果显示在High Five细胞中得到了相对分子质量约为38.93ku的目的蛋白2C,Western blotting及Dot-ELISA结果显示,该表达产物对FMDV感染动物阳性血清有良好的反应性。以电泳纯化的2C蛋白为抗原建立间接ELISA,检测健康非免疫动物、免疫动物及FM-DV试验感染动物血清,结果表明2C-ELISA不但能区分免疫动物和感染动物的血清,而且还能检测FMDV感染早期动物血清中的2C抗体。说明昆虫细胞表达的2C蛋白可作为FMDV疫苗免疫动物与自然感染动物鉴别诊断的良好抗原。2C基因在Bac-to-Bac系统中的成功表达为建立通过检测几种NSP抗体,筛查感染及隐性带毒动物,净化畜群的方法奠定了基础。
分类号： S852.659.6
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