文献类型： 中文期刊
作者： 高闪电;常惠芸;独军政;邵军军;丛国正;林彤;韩雪清;谢庆阁
作者机构：
关键词： SAT2型口蹄疫病毒;结构蛋白VP1;原核表达;反应原性分析
期刊名称：细胞与分子免疫学杂志
ISSN： 1007-8738
年卷期： 2010 年 26 卷 007 期
页码： 631-634
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 目的:表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP1及其C端,进行反应原性分析并制备多克隆抗体.方法:以SAT2型口蹄疫病毒南非地区分离株结构蛋白VP1编码区的重组克隆载体为模板,设计特异性引物,扩增VP1基因及其C端编码区,然后将该其分别克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌工程菌株BL21(DE3)plysS,经IPTG诱导,以金属离子螯合层析法对表达的VP1、VP1 C端融合蛋白进行纯化,经Western blot对其反应原性进行分析.用纯化的蛋白免疫新西兰大耳白兔制备其多克隆抗体,以ELISA方法测定抗体效价.结果:实现了SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP1及其C端的高效表达,表达产物主要以包涵体的形式存在.SDS-PAGE显示纯化的目的蛋白分别在相对分子质量35 000和19 000处有单一目的条带,具有较高的纯度.Western blot结果显示,纯化的VP1及其C端均可与牛SAT2型FMDV阳性血清反应,而与阴性对照血清无交叉反应.结论:用纯化的VP1及VP1C融合蛋白免疫新西兰大耳白兔制备的多克隆抗体效价达1:12 800以上,具有较高的特异性.
分类号： S852.65
- 相关文献
[1]几种蜱MLP基因的表达及其表达产物反应原性的分析. 沈辉,刘光远,柴慧萍,田占成,谢俊仁,罗金,张萍,田美媛,殷宏. 2012
[2]羊口疮病毒B2L基因的原核表达、纯化及反应原性分析. 石正旺,刘华南,胡永浩,郑海学. 2016
[3]中华泰勒虫MPSP基因的原核表达及反应原性分析. 赵帅阳,李有全,刘爱红,刘军龙,刘志杰,马米玲,任巧云,赵洪喜,杨聪山,卢海燕,殷宏,关贵全,罗建勋. 2014
[4]莫氏巴贝斯虫trap基因的克隆表达及反应原性分析. 何欣,刘军龙,刘爱红,王锦明,牛庆丽,李有全,殷宏,罗建勋,关贵全. 2017
[5]羊巴贝斯虫未定种trap基因的克隆表达及反应原性分析. 何欣,刘军龙,刘爱红,王锦明,牛庆丽,李有全,殷宏,罗建勋,关贵全. 2018
[6]A型口蹄疫病毒型特异性抗原的可溶性原核表达及多克隆抗体的制备. 高闪电,常惠芸,独军政,丛国正,邵军军,林彤. 2010
[7]口蹄疫病毒非结构蛋白3D原核表达、纯化和反应原性分析. 骆继怀,杨利恒,高闪电,独军政,常惠芸,薛慧文. 2012
[8]口蹄疫病毒A/GDMM/CHA/2013株结构蛋白VP1H-2d限制性CTL表位预测. 尚延丽,冯霞,靳野,张晓霞,张柳,马军武. 2015
[9]A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达·纯化及活性检测. 李菁,林彤,高闪电,丛国正,独军政,邵军军,常惠芸. 2010
[10]A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达·纯化及活性检测(英文). 李菁,林彤,高闪电,丛国正,独军政,邵军军,常惠芸. 2010
[11]A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达·纯化及活性检测(英文). 李菁,林彤,高闪电,丛国正,独军政,邵军军,常惠芸. 2010
[12]口蹄疫病毒A/GDMM/CHA/2013株结构蛋白VP1 H-2d限制性CTL表位预测. 尚延丽,冯霞,靳野,张晓霞,张柳,马军武. 2015
[13]口蹄疫病毒结构蛋白VP1上B细胞表位的筛选鉴定. 张昱,王永录,张永光,方玉珍,潘丽,蒋守田,吕建亮,刘力宽,张中旺,张淑刚,李正丰,杜进鑫. 2009
[14]单核细胞增生李斯特菌新型内化素lmo0549的分子特征及其表达. 王立霞,孟庆玲,乔军,郭晶,伍晔晖,才学鹏,蔡扩军,王登峰. 2019
[15]小反刍兽疫病毒N蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备. 周岩岩,李玲霞,吴锦艳,余树芳,李娇阳,刘丹,冯倩,孙晶晶,何苗,魏凡华,尚佑军. 2019
[16]棉花转甲基酶基因GhBSMT1的克隆、原核表达及表达谱分析. 井维霞,黄欣蒸,刘丹凤,张强,寇俊凤,曲爱军,张永军,郭予元. 2017
[17]蛋白激发子Hrip1互作蛋白的筛选及其原核表达. 李书鹏,杨秀芬,袁京京,邱德文. 2017
[18]二化螟APN1的原核表达及其与Cry2Aa蛋白的结合特性研究. 刘慧,李博,牛林,邱林,王永. 2018
[19]家蚕微孢子虫己糖激酶基因的克隆及序列结构分析和原核表达. 陈红丽,彭祥然,李孝良,Bismark Kyei,尚瑞沙,齐静茹,张轶岭,徐莉,沈中元. 2018
[20]豆科凝集素基因Le4的克隆及其表达产物对蚜虫的抗性. 周英,谢红卫,刘长爱,况琼,潘境涛. 2016
作者其他论文 更多>>
-
牛结节性皮肤病病毒A4L蛋白的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的初步建立
作者：胡琬彬;包燕玲;宋昱庆;张格林;田占成;关贵全;何俊峰;殷宏;独军政
关键词：结节性皮肤病病毒;A4L蛋白;大肠杆菌表达;间接ELISA
-
结节性皮肤病病毒A27L蛋白的可溶性表达及其多克隆抗体制备
作者：包燕玲;宋昱庆;户鑫兵;张格林;田占成;关贵全;罗建勋;苟惠天;殷宏;独军政
关键词：结节性皮肤病病毒;A27L蛋白;可溶性表达;多克隆抗体
-
口蹄疫病毒O型中和单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定
作者：孙悦;邵军军;高闪电;周广青;郭慧琛;常惠芸;张勇;赵兴绪;刘伟
关键词：口蹄疫病毒;血清型;VP1;中和抗体;表位鉴定
-
蓝舌病毒血清1型VP5蛋白的截短表达及其单克隆抗体的制备
作者：刘学春;户鑫兵;宋昱庆;孟凡华;田占成;关贵全;殷宏;独军政
关键词：蓝舌病毒;VP5蛋白;截短表达;单克隆抗体
-
牛结节性皮肤病病毒A33R蛋白的截短表达及间接ELISA抗体检测方法的建立
作者：包燕玲;宋昱庆;户鑫兵;钟匀汝;田占成;苟惠天;关贵全;殷宏;独军政
关键词：牛结节性皮肤病病毒;A33R△45-67aa蛋白;截短表达;间接ELISA
-
流行性出血病病毒VP7蛋白的表达及其单克隆抗体制备
作者：钟匀汝;张雨;宋昱庆;户鑫兵;田占成;关贵全;罗建勋;艾军;何俊峰;殷宏;独军政
关键词：流行性出血病病毒;VP7蛋白;蛋白表达与纯化;单克隆抗体
-
非洲猪瘟病毒载体疫苗的研究进展
作者：马云云;刘伟;卢海燕;高闪电;邵军军;常惠芸
关键词：非洲猪瘟;非洲猪瘟病毒;病毒载体;疫苗