牛结节性皮肤病病毒A33R蛋白的截短表达及间接ELISA抗体检测方法的建立
文献类型: 中文期刊
作者: 包燕玲;宋昱庆;户鑫兵;钟匀汝;田占成;苟惠天;关贵全;殷宏;独军政
作者机构:
关键词: 牛结节性皮肤病病毒;A33R△45-67aa蛋白;截短表达;间接ELISA
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2025 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2025-2026年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)
摘要: 为了建立一种快速准确的LSDV ELISA抗体检测方法,本研究参考GenBank中的LSDV A33R基因序列,设计截去编码跨膜区片段,密码子优化后合成该截短基因并克隆至原核表达质粒pET-28a,构建了重组质粒pET-28a-A33R△45-67aa,IPTG诱导表达并纯化A33R△45-67aa蛋白,以其作为诊断抗原建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示,利用大肠杆菌成功表达并纯化获得分子量为21 kDa的重组A33R△45-67aa蛋白,并建立了LSDV间接ELISA抗体检测方法,且具有良好的特异性和敏感性。批间和批内试验变异系数均低于10%,表明该间接ELISA方法重复性良好,稳定性高。该方法与法国ID Screen? Capripox双抗原夹心ELISA试剂盒检测结果总体符合率为97.7%,表明其可用于LSDV的抗体检测,将为LSD的防控提供技术支撑。
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