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牛结节性皮肤病病毒A4L蛋白的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的初步建立

文献类型： 中文期刊

作者： 胡琬彬;包燕玲;宋昱庆;张格林;田占成;关贵全;何俊峰;殷宏;独军政

作者机构：

关键词： 结节性皮肤病病毒;A4L蛋白;大肠杆菌表达;间接ELISA

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2026 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为深入研究牛结节性皮肤病病毒（LSDV）A4L蛋白的生物学功能，并筛选牛结节性皮肤病（LSD）的候选诊断抗原，本研究首先构建了原核重组表达质粒pET-28a-A4L，转化其至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，经IPTG诱导表达后，利用Ni-NTA树脂纯化A4L蛋白，将其免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，并通过Western-blot和间接免疫荧光鉴定，同时以A4L蛋白作为包被抗原建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示，利用大肠杆菌成功表达获得了高纯度的重组A4L蛋白；制备的兔源A4L蛋白多克隆抗体能与真核表达的A4L蛋白特异性结合；建立了基于A4L蛋白的LSDV ELISA抗体检测方法，与感染口蹄疫病毒和牛流行热病毒的牛阳性血清无交叉反应，与ID Screen? Capripox 双抗原夹心ELISA试剂盒的总体检测符合率为98.2%。这为进一步研究LSDV A4L蛋白生物学功能以及LSD的诊断和防控提供技术支撑。

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