数字农科院2.0

流行性出血病病毒VP7蛋白的表达及其单克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

作者： 钟匀汝;张雨;宋昱庆;户鑫兵;田占成;关贵全;罗建勋;艾军;何俊峰;殷宏;独军政

作者机构：

关键词： 流行性出血病病毒;VP7蛋白;蛋白表达与纯化;单克隆抗体

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 流行性出血病是由流行性出血病病毒(EHDV)经库蠓叮咬传播感染牛、羊、鹿等反刍动物的非接触性传染病，EHDVVP7蛋白是该病诊断的靶标蛋白。本研究参照GenBank中已发表的基因序列经密码子优化后人工合成EHDVVP7基因，将该基因克隆至表达质粒pET-28a，构建重组质粒pET-EHDV VP7，将其转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)，以IPTG诱导表达且优化表达条件，通过Ni-NTA亲和层析法对表达的VP7蛋白进行纯化并用不同浓度咪唑透析复性，用复性后的VP7蛋白免疫BALB/c小鼠，利用杂交瘤技术制备抗VP7蛋白单克隆抗体。通过间接酶联免疫吸附试验、免疫印迹和细胞免疫荧光试验验证单克隆抗体的特异性。结果显示，利用大肠杆菌表达系统成功表达重组EHDVVP7蛋白，纯化后制备了2株稳定分泌针对EHDVVP7蛋白的单克隆抗体，分别命名为1D10和3C11，这2株单克隆抗体不仅能与大肠杆菌表达的重组EHDVVP7蛋白反应，而且也能与真核细胞表达的重组EHDVVP7蛋白结合，同时这2株单克隆抗体与重组蓝舌病毒VP7蛋白和重组非洲马瘟病毒VP7蛋白不发生反应。本研究成功表达和纯化出了重组...

分类号：

  • 相关文献

[1]抗蓝舌病病毒VP7和NS2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 秦永丽,孙恩成,耿宏伟,杨涛,刘霓红,赵晶,王凌凤,徐青元,蔡绪禹,李文京,吴东来. 2011

[2]抗蓝舌病病毒VP6和VP7蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 魏鹏,孙恩成,刘霓红,杨涛,徐青元,秦永丽,赵晶,冯瑜菲,王文世,张翠云,吴东来. 2012

[3]非洲马瘟病毒VP7蛋白的可溶性表达及抗体阻断ELISA方法的初步建立. 徐婧,户鑫兵,宋昱庆,张鸿歌,田占成,关贵全,罗建勋,殷宏,魏衍全,独军政. 2024

[4]CHO细胞表达重组猪干扰素-γ及其抗病毒活性. 王凌云,郝荣增,杨洋,李亚军,卢炳州,毛玉涵,张越,龚真莉,刘艳红,齐萌,茹毅,郑海学. 2023

[5]非洲马瘟病毒VP7蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立. 潘佳亮,高利,相文华,戚亭,郭巍. 2013

[6]蓝舌病病毒VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位的初步鉴定. 魏天,徐青元,耿宏伟,冯瑜菲,杨涛,孙恩成,席娜,刘二战,钱爱东. 2014

[7]非洲马瘟病毒VP7蛋白在昆虫细胞中的表达及其抗体制备. 户鑫兵,高闪电,田占成,范亚亚,关贵全,刘光远,罗建勋,殷宏,独军政. 2022

[8]非洲马瘟病毒重组VP7蛋白在大肠杆菌中的表达及多克隆抗体的制备与鉴定. 王轩莹,户鑫兵,罗昭依,田占成,高闪电,殷宏,罗建勋,关贵全,苟惠天,独军政. 2023

[9]荧光素酶免疫吸附法高灵敏检测蓝舌病病毒抗体方法的建立. 张鸿歌,田占成,独军政,王琼洁,康棣,户鑫兵,张忠辉,关贵全,殷宏. 2024

[10]甘蔗花叶病毒单克隆抗体的制备及其血清学检测应用. 饶黎霞,黄德青,周雪平,钱亚娟,吴建祥. 2018

[11]柑橘碎叶病毒(CTLV)单克隆抗体的制备及其检测应用. 宋西娇,段硕,洪健,周常勇,周雪平,吴建祥. 2017

[12]检测南方水稻黑条矮缩病毒胶体金免疫试纸条的建立. 吴建祥,饶黎霞,陈浙,傅帅,周雪平. 2017

[13]牛轮状病毒抗原捕获ELISA方法的建立与应用. 常继涛,张佳昕,于力. 2018

[14]牛分枝杆菌MPB70蛋白单克隆抗体的制备及检测. 周曼莉,周玉成,张海威,乔连江,杨艳玲. 2019

[15]柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其在蛋白定位中的应用. 李莎,梁思婷,赵其平,韩红玉,朱顺海,翟颀,杨斯涵,黄兵,董辉. 2015

[16]一种柔嫩艾美耳球虫棒状体蛋白单抗的制备及初步应用. 平宪卿,韩红玉,姜连连,赵其平,董辉,黄兵,岳城,李洋,郭涛,朱顺海. 2010

[17]新城疫病毒基因型差异性单克隆抗体的制备及鉴定. 任亭亭,李仕超,詹媛,孟春春,孙英杰,宋翠萍,谭磊,封振,仇旭升,丁铲. 2015

[18]猪细小病毒1型VP2蛋白表达与单克隆抗体制备及其应用. 孙建慧,黄立平,危艳武,吴洪丽,王一平,张辉,刘丹,陈冬杰,张智慧,刘长明. 2014

[19]猪传染性胃肠炎病毒NSP5蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定. 董慧,张鑫,陈建飞,时洪艳,石达,常铁城,谷凤丽,徐天,王智琴. 2015

[20]H9亚型禽流感病毒基质蛋白M1单克隆抗体的制备与鉴定. 戴晓光,滕巧泱,黄海碧,王朝霞,张树梅,张旭,徐大伟,申之义,李泽君. 2010

作者其他论文 更多>>