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秦川牛成纤维细胞的分离培养体系优化

文献类型： 中文期刊

作者： 冯贤辀;陈辉;贾永宏;刘松奇;温飞;郭松茂;韩帅琪;胡建宏

作者机构：

关键词： 秦川牛;皮肤组织;成纤维细胞;组织块培养法;酶消化法

期刊名称：生物学杂志

ISSN： 2095-1736

年卷期： 2023 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2023版）

摘要： 为建立秦川牛体细胞分离培养体系,分别选用组织块培养法、胰酶-胶原酶消化法和胶原酶-胰酶消化法提取秦川牛耳缘成纤维细胞。结果表明:组织块培养法获取成纤维细胞所需周期长,组织块贴壁17 d后可获得原代成纤维细胞,而双酶消化法在原代细胞贴壁至9 d时便可进行传代纯化培养;与双酶消化法II相比,双酶消化法I获得的原代成纤维细胞浓度1.24×10~6 mL-1显著高于双酶消化法II(0.9×10~6 mL-1)（P＜0.05）;传代培养5 d后,细胞汇合度达到80%,取第三代成纤维细胞进行免疫荧光和流式细胞术鉴定,表明成纤维细胞纯度达到95%以上;纯化后的成纤维细胞培养至第3天,开始进入对数生长期,第8天时增殖速度下降进入平台期。因此,双酶消化法I（0.25%胰酶处理30 min,再用1%胶原酶处理60 min）为分离培养秦川牛耳缘成纤维细胞的最佳方法。

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