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鸭疫里默氏杆菌血清2型ELISA抗体检测方法的建立和应用

文献类型： 中文期刊

作者： 陈美潼;郭容;高崧;于圣青

作者机构：

关键词： 鸭疫里默氏杆菌;脂多糖;间接ELISA;抗体检测方法

期刊名称：微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2025 年

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收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版）

摘要： 【背景】鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer，RA）感染对家禽养殖业造成巨大的经济损失。RA血清型众多且相互之间没有交叉保护，因此建立一种快速检测方法鉴定流行菌株的血清型，并制备血清型特异性的疫苗进行免疫对于防治该病具有重要的意义。【目的】建立一种血清2型特异性的鸭疫里默氏杆菌ELISA抗体检测方法，能够有效地检测2型RA感染和免疫鸭血清中的特异性抗体。【方法】通过热酚水法（hot phenol-water method）提取鸭疫里默氏杆菌血清2型菌株脂多糖（lipopolysaccharide， LPS），包被ELISA板。通过优化抗原包被条件、待检血清/兔抗鸭酶标抗体的稀释倍数和孵育条件、以及底物的显色时间等反应条件，成功建立了一种检测血清2型RA抗体的间接ELISA方法。【结果】优化反应条件后确定的最佳方案为：以5 μg/mL LPS作为包被抗原浓度、PBS作为包被液、100 μL/孔加入酶标板，4℃包被12 h；以5%脱脂乳用作封闭液、200 μL/孔，37℃封闭2 h；待测血清稀释度为1:400、孵育时间为1 h；兔抗鸭酶标二抗稀释度为1:10 0...

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