间接酶联免疫吸附试验检测禽流感抗体的最佳工作条件
文献类型: 中文期刊
作者: 李海燕;辛晓光;田国斌;张晶;于康震
作者机构:
关键词: 禽流感,间接酶联免疫吸附试验,最佳条件
期刊名称:中国畜禽传染病
ISSN: 1008-0589
年卷期: 1998 年 04 期
页码:
收录情况: 北大核心
摘要: 禽流感病毒(AIV)感染的鸡胚尿囊液经差速离心后,再经蔗糖密度梯度离心,提纯AIV,纯化的AIV经NP40处理并反复冻融,即为AIELISA抗原,用该抗原包被聚苯乙烯微量反应板。将健康鸡IgG提纯后免疫兔,制备兔抗鸡IgG,用过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG。确立了间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测禽流感抗体的最适工作条件,即:抗原包被浓度1.9~3.8μg/ml,每孔100μl,4℃冰箱过夜;用含0.5%牛血清白蛋白(BSA)的磷酸盐缓冲液,37℃封闭60分钟;待检血清最佳稀释度为180~1640,作用60分钟;酶标抗体作12000稀释,作用60分钟。根据对52份SPF鸡血清的检测结果制定了判定标准。
分类号: S852.4,S858.3
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