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人参炭疽病菌T-DNA突变体库的构建及分析

文献类型： 中文期刊

作者： 李美仪;孙境远;宋佳龙;梁池嘉;丁冠中;刘宁;刘守安

作者机构：

关键词： 人参炭疽病;农杆菌介导转化;突变体;遗传转化

期刊名称：特产研究

ISSN： 1001-4721

年卷期： 2023 年

页码：

收录情况： 科技核心（2023版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 人参炭疽病主要由人参炭疽病菌(Colletotrichum panacicola)引起，是影响人参栽培产业的重要病害之一。T-DNA插入突变体的构建是研究其致病机理的有效手段。本研究通过对根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的人参生炭疽病菌遗传转化体系进行优化，对影响转化效率的主要因子进行单因子条件试验。结果表明，获得最优转化体系为：抑制人参炭疽病菌孢子的遗传霉素(G418)浓度为100 μg/mL，人参炭疽病菌分生孢子的浓度为105个/mL，农杆菌OD600值为0.9，乙酰丁香酮(AS)浓度为 200 μmol/L，共培养时间为48 h；从人参炭疽病菌T-DNA突变体库中，随机挑选8个转化子进行PCR验证，结果均为阳性；经PDA平板10代培养仍具有G418抗性，验证了T-DNA插入片段的遗传稳定性。本研究优化了农杆菌介导的人参炭疽病菌遗传转化体系，初步构建了人参炭疽病菌T-DNA插入突变体库，为人参炭疽病菌的分子致病机理及有效防治提供理论支撑。

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