猪繁殖与呼吸综合征基因标记疫苗株NP49-ELISA鉴别诊断方法的建立
文献类型: 中文期刊
作者: 孙晶;周艳君;徐彦召;姜一峰;童武;童光志
作者机构:
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征标记疫苗;多肽抗原;NP49-ELISA;鉴别诊断
期刊名称:中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2013 年 06 期
页码: 12-18
摘要: 猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)rHN4-Δ25+NP49株是新型基因标记弱毒疫苗候选株,为了配合对该基因标记疫苗免疫猪血清抗体的鉴别诊断,本研究以标记基因编码的NP49(新城疫病毒NP蛋白C末端49个氨基酸,即NP49)多肽作为包被抗原,建立标记疫苗免疫猪血清中NP49抗体的ELISA鉴别诊断方法。通过对NP49-ELISA工作条件的优化,结果显示NP49-ELISA的多肽抗原最适包被浓度为500 ng/孔,被检血清最佳稀释度为1:40。利用ROC曲线法确定S/P临界值为0.2,该方法批内与批间重复试验的变异系数均小于10%,与几种常见猪病阳性血清无交叉反应,具有较好重复性和特异性。本研究建立的NP49-ELISA鉴别诊断方法为猪繁殖与呼吸综合征新型基因标记疫苗的临床应用提供了有力保障。
分类号: S858.28
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