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猪肺炎支原体Mhp-1株的分离鉴定及其全基因组测序分析

文献类型： 中文期刊

作者： 周龙玉;祝瑶;林龙华;柴霁芸;马彩萍;侯杰;张万江

作者机构：

关键词： 猪肺炎支原体;分离与鉴定;全基因组测序;毒力基因

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2024 年 46 卷 6 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 为了分离与鉴定引起的猪群疑似支原体性肺炎的病原体,本实验收集了20份病死猪肺脏病变组织,采用猪肺炎支原体(Mhp)和猪鼻支原体(Mhr)特异性引物进行PCR鉴定、分析培养特性、颜色变化单位(CCU)测定、传代培养后扩增16S rRNA基因并测序分析等,并进一步采用BLAST分析分离菌16S rRNA基因序列的同源性,采用邻接法构建16S rRNA基因的系统进化树,对该分离株MLST分型、全基因组测序和毒力基因预测。结果显示,20份临床样品仅3份样品为Mhp单阳性,接种KM2液体培养基后仅1份生长良好,颜色规律性变黄；接种KM2固体培养基培养7 d后呈现特异性“煎蛋样”的菌落形态；瑞氏姬姆萨染色结果可见环状、点状、丝状、两级状等形状且大小不等的菌体形态,传12代后经特异性PCR检测结果为Mhp单阳性,表明该分离株可以稳定传代,且无Mhr污染；该分离株在KM2培养基上为1×10^(7)CCU/mL；16S rRNA基因序列比对结果显示该分离株与GenBank中登录的Mhp菌株ES-2(CP038641.1)同源性达100%。以上结果确定本研究分离出一株Mhp,并将其命名为Mhp-1。16S rRNA基因系统发育树分析结果显示,分离株Mhp-1与国外猪源Mhp分离株F7.2(KY264125.1)处于同一分支,亲缘关系最近；MLST分型结果显示Mhp-1分离株属于ST184型；全基因组测序获得序列大小为0.91 Mb,与已报道的Mhp基因组大小基本一致；毒力基因预测结果显示其存在EF-Tu、Lttp、P216、P102、P46、P97、PDH-B、Capsule、HlyA等毒力因子编码基因。本研究进一步丰富了Mhp的研究数据,为规模化猪场猪支原体性肺炎的防控提供参考数据。

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