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口蹄疫病毒非结构蛋白3D单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 田美娜;李永亮;卢曾军;付元芳;袁明;刘湘涛;刘在新

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;非结构蛋白3D;单克隆抗体;原核表达

期刊名称：细胞与分子免疫学杂志

ISSN： 1007-8738

年卷期： 2009 年 25 卷 07 期

页码： 625-627

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:制备并鉴定口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3D的单克隆抗体(mAb)。方法:以纯化的原核表达3D蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌抗体,用Western blot以及间接免疫荧光法对mAbs的特异性等进行鉴定。结果:免疫的BALB/c小鼠经过多次融合筛选,共获得5株抗pET28a-3D的mAb,其亚类鉴定3株为IgG1,2株为IgG2b,初步判定所得5株mAb识别2个不同表位。Western blot显示这些mAbs与重组3D蛋白和FMDVO/China99感染的BHK-21细胞中的3D抗原均特异性结合,免疫荧光结果显示这5株mAb能够特异结合FMDV感染细胞中的3D蛋白。结论:成功获得了能识别自然3D蛋白的特异性mAb,为进一步研究3D蛋白的结构和功能以及诊断方法奠定基础。

分类号： R392.11

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