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产气荚膜梭菌青海分离株α毒素基因克隆与表达

文献类型： 中文期刊

作者： 王光华;周继章;蔺国珍;郑福英;曹小安;邱昌庆

作者机构：

关键词： 产气荚膜梭菌;α毒素基因;基因克隆;核苷酸序列

期刊名称：浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2010 年 22 卷 02 期

页码： 145-149

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用PCR技术,从一株田间分离的产气荚膜梭菌基因组中扩增出了1194bp的α毒素基因,经限制性核酸内切酶EcoRⅠ和NcoⅠ双酶切处理后将其连接在经同样内切酶处理的载体pET-28a(+)中的相应位点上,最后转化至受体菌BL21(DE3)中。经PCR、双酶切和核苷酸序列分析,证明重组质粒pET-28a-CPA含有产气荚膜梭菌α毒素基因,再将其转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,目的基因获得了良好表达。以羊抗α毒素多克隆血清进行Western blot分析,抗血清可与该融合蛋白发生特异性反应,表明目的蛋白具有较好的免疫原性。

分类号： Q78

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