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弓形虫硫氧还蛋白样蛋白基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 杨晓宇;王萌;张德林

作者机构：

关键词： 刚地弓形虫;硫氧还蛋白样蛋白;原核表达;反应原性

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 11 期

页码： 1145-1149

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为掌握刚地弓形虫硫氧还蛋白样蛋白(thioredoxin-like,TRXL)的生物学特性及其作为诊断候选分子的潜力,针对trxl基因序列设计引物,通过RT-PCR法扩增弓形虫trxl基因,并将其连接至pET-30a(+)原核表达载体。转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,分析了rTRXL蛋白的反应原性。结果显示,弓形虫trxl基因全长1 275bp,共编码424个氨基酸,与GenBank中下载的弓形虫ME49株trxl基因的参考序列完全一致。SDS-PAGE分析表明,诱导表达的重组蛋白rTRXL的大小约48ku,与预期的结果相符,主要以包涵体形式存在。Western-blot结果显示,重组蛋白rTRXL能被感染弓形虫的猪阳性血清识别,表明重组蛋白rTRXL具有良好的反应原性。上述研究结果为弓形虫rTRXL蛋白作为新型弓形虫诊断试剂候选抗原的研究奠定了基础。

分类号： S852.7

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