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猫Ⅰ型疱疹病毒DAN疫苗的构建及免疫效果的评估

文献类型： 中文期刊

作者： 李立鹏;林委卫;冯可昕;陈梦茹;康洪涛;姜骞;刘家森;赵鹏

作者机构：

关键词： 猫Ⅰ型疱疹病毒;gB蛋白;gD蛋白;DNA疫苗;免疫原性

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2025 年 47 卷 7 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 猫Ⅰ型疱疹病毒(FHV-1)表面糖蛋白gB、gD是病毒感染侵入和复制过程所必须的糖蛋白,均具有免疫原性。为评价FHV-1 gB和gD基因DNA疫苗的免疫效果,本研究设计并优化基因编码序列后合成FHV-1 gB和gD基因,分别连接至pVAX1载体构建真核表达载体pVAX1-gB、pVAX1-gD,经PCR和测序鉴定结果显示二者插入位置及基因序列均与预期一致。将重组质粒pVAX1-gB、pVAX1-gD分别转染猫肾细胞(CRFK),经间接免疫荧光试验(IFA)检测gB和gD蛋白在细胞中是否表达。结果显示gB、gD蛋白在细胞中均获得了表达。分别取重组质粒pVAX1-gB、pVAX1-gD各50μg,经肌肉注射6周龄~7周龄雌性BALB/c小鼠,4次免疫后采用IFA检测小鼠抗体水平,结果显示小鼠体内产生的抗体效价在1:64~1:256。将50μg pVAX1-gB和50μg pVAX1-gD重组质粒混合后,分别经肌肉注射45日龄~90日龄中华田园猫,二免后不同时间采血分离血清,经固定病毒稀释血清法检测猫血清的中和抗体效价,结果显示其中和抗体效价达1:141左右。二免后21 d的猫经FHV-1(10^(6)TCID50/mL)滴鼻攻毒(0.5 mL/只),结果显示,对照组猫全部发病,免疫组猫仅产生轻微临床症状,表明本实验制备的含FHV-1 gD和gB重组质粒的混合物免疫后可诱导猫产生良好的免疫保护效果。本实验首次证实FHV-1 gB基因和gD基因的DNA疫苗具有良好的免疫原性,为FHV-1 DNA疫苗的研究提供了实验依据。

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